معلومات عن تحضير محاليل الذهب الغروية لاختبار المستضد

تحضير محلول الذهب الغروي اختبار المستضد يعتمد طريقة تخفيض سترات ثلاثي الصوديوم لتحضير محلول الذهب الغروي.خذ 1000 مل من الماء عالي النقاء وقم بتسخينه حتى الغليان على محرك مغناطيسي، أضف 40 مل من محلول حمض الكلوروريك 1%، عندما يغلي المحلول مرة أخرى، أضف بسرعة 36 مل من محلول سترات ثلاثي الصوديوم 1%، واستمر في الغليان عندما يتغير لون الماء. يتحول المحلول إلى اللون الأرجواني لمدة 5 دقائق، ثم قم بإيقاف تشغيل المدفأة، ثم قم باستعادة الحجم الأصلي باستخدام الماء عالي النقاوة بعد التبريد.تم قياس متوسط ​​القطر وإمكانات زيتا لجزيئات الذهب الغروية باستخدام محلل حجم الجسيمات النانوية وتخزينها في درجة حرارة الغرفة في الظلام.فما هي المعلومات حول تحضير محاليل الذهب الغروية لاختبار المستضد؟لنلقي نظرة.

وهنا قائمة المحتوى:

ل تحضير اتحادات الذهب الغروية المسمى

ل إعداد شرائط اختبار المستضد السريع

ل الحد الأدنى للكشف

ل اختبار الاستقرار

تحضير اتحادات الذهب الغروية المسمى

خذ 100 مل من الذهب الغروي لاختبار المستضد في كوبين نظيفين، على التوالي، وفقًا لظروف الرقم الهيدروجيني المحددة، أضف 3.3 مل و2.1 مل من 0.1 مول/لتر من كربونات البوتاسيوم لضبط الرقم الهيدروجيني، وحركه باستخدام محرك مغناطيسي عند 300 دورة/لتر. دقيقة لمدة 10 دقائق، وإضافة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لبروتين الفأر المضاد لـ N وبروتين DNP-BSA كان كل منهما 1 مجم وتم التقليب لمدة 15 دقيقة؛تمت إضافة 2 مل من محلول BSA 10%، وأضيف 2 مل من محلول BSA 10%، واستمر التحريك لمدة 20 دقيقة؛بعد التحريك، تم نقل محلول الذهب الغروي لاختبار المستضد إلى أنبوبين للطرد المركزي سعة 50 مل، وتم ضبط معلمات الطرد المركزي على 9000 دورة / دقيقة، و20 دقيقة، و4 درجات مئوية، وتم إجراء الطرد المركزي.بعد الطرد المركزي، أخرج أنبوب الطرد المركزي بعناية، لا تهزه، قم بإزالة المادة طافية باستخدام ماصة، وجمع الراسب، وأعد تشكيله بمخفف مترافق إلى 10 مل، وخزنه عند درجة حرارة 4 درجات مئوية في الظلام.تم قياس متوسط ​​القطر وإمكانات زيتا لجزيئات الذهب الغروية المترافقة في اختبار المستضد بواسطة محلل حجم الجسيمات النانوية.

تحضير شرائط اختبار المستضد السريع

تمت تغطية وسادة العينة بشكل موحد بمحلول معالجة وسادة العينة، وكانت كمية الطلاء لكل ألياف زجاجية 30 مل وتجفيفها عند 50 درجة مئوية لمدة 24 ساعة.تمييع اختبار المستضد السريع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لبروتين الفأر المضاد للـ N الغروية المسمى بالذهب والبروتين DNP-BSA الغروي المسمى بالذهب مع مادة مخففة مترافقة، ونسبة الحجم هي 18% و20% على التوالي، ويتم التعامل مع مترافق الذهب الغروي المخفف، وكانت وسادة المقرنة بشكل موحد المغلفة بالسائل، كانت كمية الطلاء لكل ألياف زجاجية 30 مل، وتم تجفيفها عند 45 درجة مئوية لمدة 24 ساعة.تم تخفيف الجسم المضاد أحادي النسيلة البروتيني المضاد لـ N والجسم المضاد متعدد النسيلة المضاد لـ DNP للأرنب باستخدام برنامج تلفزيوني يحتوي على 0.01 مول/لتر pH7.4 و5% تريهالوز إلى تركيز 2.0 ملجم/مل و1.0 ملجم/مل، على التوالي.كخط الكشف (خط T) وخط مراقبة الجودة (Cline)، تم طلاء الجسم المضاد الالتقاط على غشاء نيتروسيليلوز (غشاء NC) وتجفيفه عند 45 درجة مئوية لمدة 48 ساعة.تم لصق فيلم NC المُجهز، والوسادة المترافقة، ولوحة العينة، ووسادة امتصاص الماء على اللوحة السفلية PVC بدورها، وتقطيعها إلى 3 مم/شريط باستخدام أداة القطع، ووضعها في علبة بطاقات، وتعبئتها في كيس رقائق الألومنيوم.أثناء الاختبار، أدخل المسحة البلعومية الأنفية في أنبوب الرفع المملوء مسبقًا بمحلول الاستخلاص (10 ملمول/LPBS، الرقم الهيدروجيني 7.4، 1%NP-40)، وأضف 3 قطرات (100 ميكرولتر) قطرة قطرة إلى فتحة عينة الاختبار البطاقة بعد استخراجها لمدة 15 ثانية.وقت رد الفعل 15 دقيقة للتفسير البصري.اختبار المستضد T line وCline كلاهما إيجابي، خط T غير ملون، Cline سلبي، Cline غير ملون، مما يشير إلى أن شريط الاختبار فعال، ويحتاج إلى إعادة الاختبار.

الحد الأدنى للكشف

تم إجراء دراسات الحد الأدنى للكشف باستخدام مزارع الفيروسات المقتولة بالحرارة.تم استخدام الشطف المأخوذ من مسحات البلعوم الأنفي من الأشخاص الأصحاء كمصفوفة سلبية لاختبار المستضد.أولاً، تم إجراء تخفيف التدرج 10 أضعاف.بعد النتيجة السلبية لاختبار المستضد السريع، كان التركيز السابق بعد ذلك مخففًا متدرجًا بمقدار ضعفين، وكان ما لا يقل عن 19 مرة من أصل 20 اختبارًا إيجابيًا.تم استخدام مستوى التركيز (≥95٪) كحد أدنى للكشف عن الكاشف.

اختبار الاستقرار

ضع بطاقة الكاشف النهائية لاختبار المستضد المُجهزة في فرن بدرجة حرارة 50 درجة مئوية، واختبرها بمواد مراقبة الجودة ذات التركيز العالي والمنخفض كل أسبوعين.كرر الاختبار 3 مرات لكل عينة.الفرق في عمق النطاق بين كاشف التدمير المعجل بدرجة الحرارة المرتفعة وكاشف التحكم لمدة أسبوع و8 أسابيع.

ما ورد أعلاه هو المعلومات ذات الصلة حول تحضير محلول الذهب الغروي لاختبار المستضد.إذا كنت مهتمًا بـ اختبار المستضد السريع لكوفيد-19، اختبار المستضد السريع لـ SARS-CoV-2، يمكنك الاتصال بنا.موقعنا هو www.bioteke.cn.