كيفية اختيار محلول حفظ العينات？

كيفية اختيار نوع محلول الحفظ？

وفقًا لتركيبة السائل، يمكن تقسيمه تقريبًا إلى نوعين، معطل وغير معطل. من بينها، يحتوي محلول الحفاظ على الفيروسات المعطل على تريس، وملح جوانيدين، وEDTA، وما إلى ذلك، والغرض الرئيسي منه هو تدمير طبقات البروتين للخلايا والفيروسات، وإطلاق الأحماض النووية، بحيث يمكن إجراء الكشف عن الحمض النووي عن طريق RT-PCR الفلورسنت اللاحق في الوقت الحقيقي لتحديد ما إذا كانت العينة تحتوي على تسلسل الفيروس.

يمكن لمحلول الحفظ المعطل أن يحلل بنية الفيروس بشكل فعال ويجعله يفقد القدرة على العدوى. إنه أكثر أمانًا للمفتشين ويمكن أن يمنع بشكل فعال تكاثر الفطريات والبكتيريا. ومع ذلك، بسبب إضافة ملح الجوانيدين، فإنه قد يترك أيونات الملح في محلول الحمض النووي. إذا كان التركيز مرتفعًا جدًا، وإذا كان نشاط البوليميراز في مجموعة الاختبار النهائية حساسًا للغاية لتركيز أيون الملح، فسوف يتسبب ذلك في تأخر قيمة Ct للاختبار أو حتى سلبية كاذبة.

يشتمل حل الحفظ غير المعطل عمومًا على أنواع UTM وVTM. تعتمد مكونات محلول الحفاظ على الفيروسات غير المعطل بشكل أساسي على محلول هانك. على أساس محلول هانك، فإنه يضيف أيضًا العديد من المخازن المؤقتة مثل الجنتاميسين، والمضادات الحيوية الفطرية، وBSA (البقري المكون الخامس لألبومين المصل)، والعازل البيولوجي HEPES، والأحماض الأمينية، والمواد الواقية من البرد، والجلسرين ومكونات أخرى تستخدم للحفاظ على سلامة الفيروس ونشاطه البيولوجي. يحافظ محلول الحفظ غير المعطل على سلامة الفيروس بشكل أفضل، وبالتالي فإن معدل الكشف أعلى، ولكنه يحتاج إلى معالجة التعطيل بحمام مائي قبل الكشف.

يمكن للمستخدمين اختيار نوع حل الحفظ بشكل معقول وفقًا لسيناريوهات الاستخدام الخاصة بهم.

2، بعد تخزين العينة، ما هي حساسية الكشف؟

من أجل تسهيل اختيار أنواع مختلفة من أنابيب التخزين، قمنا باختبار علامات تجارية مختلفة، تحت ظروف تخزين 4 درجات مئوية، وأيام تخزين مختلفة. حساسية الكشف عن الحمض النووي لفيروس كورونا الجديد هي كما يلي.

بعد 14 يومًا من التخزين عند 4 درجات مئوية، مقارنة تأثير الحفظ لماركات مختلفة من UTM

ولتسهيل اختيار أنواع مختلفة من أنابيب الحفظ، قمنا باختبار حساسية الكشف عن الحمض النووي لفيروس كورونا الجديد تحت علامات تجارية مختلفة، وظروف تخزين في درجة حرارة الغرفة، وأيام تخزين مختلفة (اليوم الأول، اليوم الثالث، واليوم السابع). النتائج هي كما يلي.

بعد 7 أيام من التخزين في درجة حرارة الغرفة، تمت مقارنة تأثيرات تخزين العلامات التجارية المختلفة لـ ITM

بعد 7 أيام من التخزين في درجة حرارة الغرفة، تمت مقارنة تأثيرات تخزين ماركات مختلفة من VTM

بعد 7 أيام من التخزين في درجة حرارة الغرفة، مقارنة تأثيرات التخزين لماركات مختلفة من UTM

بشكل عام، قيمة Ct Bioteke أقل من بعض العلامات التجارية الشائعة في السوق، بغض النظر عن درجة حرارة الغرفة أو ظروف التخزين 4 درجات مئوية. حساسية الكشف أعلى ونتائج الاختبار أكثر استقرارًا.

3. ما هو تأثير محلول الحفاظ على التعطيل (ITM)؟

عدد اللويحة في أوقات مختلفة من التعطيل (0، 1، 2، 5، 10، 20، 40 دقيقة)

أشكال البلاك في أوقات مختلفة من التعطيل (0، 1، 5، 40 دقيقة) (تظهر اللوحة في المربع الأحمر)

الاستنتاجات:

يمكن لمنتج Bioteke، الذي يقوم بتعطيل وسائط النقل (ITM)، أن يعطل فيروس HSV 1 بشكل فعال.

4、ميزات Bioteke حل الحفاظ على الفيروسات

أ) توفير أنواع متعددة من حلول الحفظ مثل UTM وVTM وITM؛

ب) يمكن استخدامه مع مسحة Bioteke لتلبية الاحتياجات المتعددة؛

ج) مواد خام مختارة، متطابقة مع مجموعة استخراج الحمض النووي Bioteke لضمان كمية النسخة الأولية للعينة.

5. تقارير الفحص التي حصل عليها Bioteke لحل حماية الفيروسات

المرفقات: بيئة الإنتاج

مراجع

[1]《دليل تكنولوجيا الاختبارات المعملية الجديدة للالتهاب الرئوي التاجي (الإصدار الثالث)》، المركز الصيني لمكافحة الأمراض والوقاية منها.

【2】《إرشادات مؤقتة لجمع ومعالجة واختبار العينات السريرية من المرضى قيد التحقيق (PUIs) لفيروس كورونا الجديد (2019-nCoV)》.

【 3 】 أ. ستيفن ك هاشمي، ميريام بوهرلي، مايكل وول فلي، وآخرون.

تأهيل المسحات المتجمعة عالية الاسترداد مقارنةً بمسحات الحرير الصناعي التقليدية للمراقبة البيئية الميكروبيولوجية للأسطح [J]. مجلة المساعد الرقمي الشخصي للعلوم الصيدلانية والتكنولوجيا، 2008، 62(3):191.

[4] Daley P, Castriciano S, Chernesky M, Smieja M. مقارنة المسحات المتجمعة والرايون لجمع الخلايا الظهارية التنفسية من المتطوعين غير المصابين والمرضى الذين تظهر عليهم الأعراض. J كلين ميكروبيول، 200؛ 44 (6): 2265-2267. دوى:10.1128/JCM.02055-05.

[5] با هواجي، جين مينغ، وانغ لينشينج، وآخرون. مقارنة تأثيرات كتابة الحمض النووي بين مسحات النايلون المتدفقة ومسحات القطن [J]. المجلة الصينية للطب الشرعي، 2015(03):53-56.

【6 】 ليو يانبين، ليو تاو، كوي يو، وانغ بو، لوه فنغمينغ. مقارنة طريقتين لأخذ العينات من مسحة الأنف ومسحة الحلق في فحص الحمض النووي للالتهاب الرئوي الفيروسي التاجي الجديد [J]. المجلة الصينية للجهاز التنفسي والرعاية الحرجة، 2020، 02:141-143.